میکروتیوب چیست؟
میکروتیوب (Microtube یا Eppendorf Tube) یکی از پرکاربردترین ظروف مصرفی در آزمایشگاههای ژنتیک، بیولوژی مولکولی، میکروبیولوژی و تحقیقاتی است. این لولههای پلاستیکی کوچک برای نگهداری، انتقال، سانتریفیوژ و انجام واکنشهای آزمایشگاهی استفاده میشوند. اگرچه در نگاه اول تفاوت زیادی میان میکروتیوبهای مختلف دیده نمیشود، اما کیفیت مواد اولیه، مقاومت در برابر سانتریفیوژ، کیفیت درب، DNase/RNase Free بودن و برند سازنده میتوانند تأثیر مستقیمی بر کیفیت نتایج آزمایشگاهی داشته باشند.
میکروتیوب چیست؟
انواع، کاربردها و نکات مهم هنگام انتخاب Microtube
- برای نگهداری، آمادهسازی و انتقال نمونه استفاده میشود.
- در حجمهای مختلف مانند ۰.۲، ۰.۵، ۱.۵ و ۲ میلیلیتر تولید میشود.
- انواع PCR، Safe-Lock و Low Binding دارد.
- کیفیت پلیپروپیلن، درب و مقاومت مکانیکی اهمیت زیادی دارد.
- در آزمایشهای مولکولی بهتر است از تیوبهای DNase/RNase Free استفاده شود.
- حداکثر RCF قابل تحمل از فاکتورهای مهم انتخاب است.
- کیفیت درب میتواند از نشت یا تبخیر نمونه جلوگیری کند.
میکروتیوب چیست؟
میکروتیوب یا Microcentrifuge Tube نوعی لوله پلاستیکی کوچک است که برای نگهداری حجم کم مایعات، DNA، RNA، پروتئینها و سایر نمونههای آزمایشگاهی استفاده میشود.
این لولهها معمولاً از پلیپروپیلن ساخته میشوند و به دلیل مقاومت شیمیایی، تحمل دمایی مناسب و قابلیت استفاده در سانتریفیوژها، از پرمصرفترین اقلام آزمایشگاهی محسوب میشوند.
میکروتیوب چگونه استفاده میشود؟
- سرم و پلاسما
- DNA و RNA
- پروتئین و معرف
- PCR
- Real-Time PCR
- مراحل استخراج
- رسوبدهی نمونه
- شستوشو
- جداسازی فازها
- کوتاهمدت
- فریزر ۲۰- و ۸۰- درجه
- آرشیو نمونه
انواع میکروتیوب بر اساس حجم
- PCR Tube
- دیواره نازک برای انتقال حرارت سریع
- مناسب PCR و Real-Time PCR
- نمونههای کمحجم
- برخی مراحل استخراج
- واکنشهای کوچک
- پرکاربردترین حجم
- استخراج DNA و RNA
- ذخیره نمونه
- آمادهسازی واکنشها
- مناسب حجمهای بیشتر
- ذخیرهسازی نمونه
- کاربرد در استخراج و سانتریفیوژ
میکروتیوب Safe-Lock چیست؟
در سانتریفیوژهای دور بالا، باز شدن ناگهانی درب تیوب میتواند باعث نشت، آلودگی و از دست رفتن نمونه شود. میکروتیوبهای Safe-Lock با طراحی ویژه درب، احتمال باز شدن ناخواسته را کاهش میدهند.
Low Binding Microtube چیست؟
DNA، RNA و برخی پروتئینها میتوانند به سطح داخلی تیوب متصل شوند و بخشی از نمونه از دست برود. تیوبهای Low Binding یا LoBind برای کاهش این اتصال سطحی طراحی شدهاند.
DNase/RNase Free چیست؟
DNase و RNase آنزیمهایی هستند که میتوانند DNA یا RNA را تخریب کنند. در کاربردهای مولکولی، آلودگی تیوب به این آنزیمها ممکن است کیفیت نمونه و نتیجه آزمایش را کاهش دهد.
- مناسب DNA و RNA
- مناسب PCR و Real-Time PCR
- کاهش احتمال تخریب نمونه
- مناسب NGS و پروژههای حساس
- کاهش کیفیت RNA
- اثر منفی بر PCR
- افزایش احتمال تکرار آزمایش
- کاهش پایداری نمونه
مقاومت در برابر سانتریفیوژ
یکی از مهمترین مشخصات هر میکروتیوب، حداکثر نیروی گریز از مرکز یا RCF قابل تحمل است. این مقدار باید از سوی سازنده اعلام شده باشد.
- حفظ شکل در RCF بالا
- عدم نشت
- درب پایدار
- مناسب استخراج و رسوبدهی
- احتمال ترکخوردگی
- تغییر شکل
- نشتی نمونه
- باز شدن ناخواسته درب
کیفیت درب میکروتیوب
در نمونههای ارزشمند، تبخیر حتی چند میکرولیتر میتواند غلظت و نتیجه نهایی آزمایش را تغییر دهد.
چگونه میکروتیوب مناسب انتخاب کنیم؟
- ۰.۲، ۰.۵، ۱.۵ یا ۲ میلیلیتر
- متناسب با حجم نمونه
- متناسب با دور سانتریفیوژ
- طبق مشخصات سازنده
- DNase/RNase Free
- Low Binding در صورت نیاز
- درب معمولی
- Safe-Lock
- آببندی مناسب
- فریزر ۲۰-
- فریزر ۸۰-
- بررسی مشخصات محصول
- پلیپروپیلن یکنواخت
- عدم زائده و تغییر شکل
- شفافیت مناسب
کاربرد میکروتیوب در آزمایشگاههای مختلف
| نوع آزمایشگاه | کاربرد |
|---|---|
| ژنتیک مولکولی | استخراج DNA و RNA، PCR و NGS |
| تشخیص طبی | نگهداری و انتقال نمونه |
| میکروبیولوژی | تهیه سوسپانسیون و سانتریفیوژ |
| کشت سلول | آمادهسازی نمونه و معرف |
| تحقیقاتی | واکنشهای مولکولی و بیوشیمیایی |
| داروسازی | کنترل کیفیت و آمادهسازی محلولها |
وکتور چگونه میتواند در خرید میکروتیوب کمک کند؟
میکروتیوبها در حجم، نوع درب، مقاومت سانتریفیوژی، استریلیتی، ویژگی DNase/RNase Free و Low Binding با یکدیگر تفاوت دارند.
در بسیاری از آزمایشگاههای ژنتیک، میکروتیوب ۱.۵ میلیلیتری پرمصرفترین نوع محسوب میشود.
برای استخراج RNA یا پروژههای NGS، استفاده از تیوبهای DNase/RNase Free و Low Binding میتواند کیفیت نتایج را بهتر حفظ کند. در سانتریفیوژهای دور بالا نیز باید از تیوبهای دارای مقاومت مکانیکی و درب مطمئن استفاده شود.
برندهای مطرح میکروتیوب
- Eppendorf
- Axygen
- Thermo Scientific
- Sarstedt
- Nest
- SPL
- Jet Biofil
- Corning
- Bio-Rad
- حجم
- حداکثر RCF
- نوع درب
- Low Binding
- DNase/RNase Free
- استریل بودن
سؤالات متداول
منابع
- Eppendorf Consumables Handbook
- Thermo Fisher Scientific Molecular Biology Consumables Guide
- ISO 11137 Sterilization of Health Care Products
- WHO Laboratory Quality Management System Handbook
- Molecular Cloning: A Laboratory Manual
- Current Protocols in Molecular Biology